Peel Plate HET (Recuento heterotróficas)
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Peel Plate HET (Recuento heterotróficas)
La prueba Peel Plate HET está basada en el agar R2A de los Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, Section 9215. El medio HET contiene el sustrato indicador redox cloruro de 2,3,5-trifeniltetrazolium (TTC). La mayoria de bacterias heterotróficas reducen el TTC y producen colonias rojas. El medio también contiene agentes gelificantes y absorbentes que permiten absorber y difundir la muestra.
Procedimiento para Prueba Peel Plate HET
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Paso 1 • Identifique la placa en el área clara, usando un marcador. No marque o identifique el área circular de 47mm. |
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Paso 2 • Cóloque la placa en una superficie nivelada y aplique presión con los dedos en la plataforma trasera (como en la foto) y levante la tapa adhesiva. • Levante la cubierta adhesiva completamente hasta exponer el disco de cultivo. Deje la parte posterior adherida a la parte trasera de la placa. * para mejores resultados, tenga las placas a temperatura ambiente antes de inocularlas. |
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Paso 3 • Manteniendo la tapa levantada y la placa en una superficie plana, agregue rápidamente, en 2 a 3 segundos, 1.0 mL* de muestra en el centro de la placa. *Nota: Si está analizando agua filtrada, re-hidrate Peel Plate con 1.5 mL de agua estéril antes de aplicar la membrana (ver Paso 4a abajo). |
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Paso 4 • La muestra se difundirá a los bordes de la placa. • Re-aplique la cubierta adhesiva*. Presione las orillas para asegurarse esté sellada. *Nota: Al cerrar, jale suavemente la cubierta adhesiva hacia el frente para evitar crear “arrugas” |
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Paso 4a • Si está analizando agua filtrada, hágala pasar por un filtro de celulosa mezclada 0.45 μm, 47 mm usando un aspirador o un aparato de vacío. • Use pinzas para remover asépticamente el filtro del aparato. • Coloque el filtro con la cuadricula hacia arriba en la placa humedecida. Aplique cuidadosamente el filtro en posición para evitar burbujas de aire. • Presione los bordes del filtro con la pinza para adherir el filtro al disco del Peel Plate. • Re-aplique la cubierta adhesiva. Presione los bordes de la placa para asegurarse que esté sellada. |
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Paso 5 • Incube las placas en oscuridad con la cubierta adhesiva hacia abajo, como se muestra en la figura. • Incube de acuerdo a las especificaciones de la siguiente tabla. Temperatura de Incubación: 20 a 28 °C Tiempo Mínimo de Incubación: 5 días Tiempo Óptimo de Incubación: 7 días • Se pueden colocar hasta 20 placas una sobre otra sin afectar la transferencia de calor |
Description
Peel Plate HET (Recuento heterotróficas)
La prueba Peel Plate HET es usada para enumeración de bacterias heterotróficas en agua. Una muestra de 1 mL de agua, o el filtro de 47 mm de una muestra filtrada a traves de 0.45 μm, se agrega a una placa HET y se incuba de 20 a 28 °C por 5 a 7 días. La prueba Peel Plate HET está diseñada para laboratorios microbiológicos, pero tambien puede ser utilizada por ingenieros, procesadores de alimentos o en plantas procesadoras de agua de municipalidades, reemplazo a placas Petrifilm.
El límite de detección del método es 1 unidad formadora de colonia por mililitro (UFC/ mL) demuestra de agua ó 1 UFC por muestra filtrada.
Aplicabilidad
La prueba Peel Plate HET tiene aplicación para agua bebible, agua procesada y agua tratada, asi como agua para beber y procesada que previamente han sido filtradas a través de 0.45 μm.
Las muestras deben ser diluidas en serie 1:10 hasta un rango contable de 30 a 300 UFC/mL por el método de extendido en placa y de 20-200 UFC por el método de incubación de filtro de membrana.
